viernes, 14 de diciembre de 2018

Técnicas de edición genómica en neumonía por Streptococcus pneumoniae

Biblioteca CRISPRi neumocócica: El estudio de 348 genes potencialmente esenciales de Streptococcus pneumoniae mediante el sistema CRISPRi inducible por IPTG (tiogalactopiranósido), a través de clonación por infusión se obtuvo aproximadamente un 89% de sgARN positivos. En este estudio se utilizó la cepa D39, se subclonó el gen dcas9sp en el plásmido pJWV102 con el promotor inducible IPTG P Iac, después se integró en el locus bgaA de Streptococcus pneumoniae D39, por otro lado se determinó en condiciones in vitro e in vivo. 
Los resultados de este sistema pueden ser utilizados para explicar la interacción huésped-microbio, además proporciona el descubrimiento de dianas farmacológicas.

Construcción y análisis de crecimiento de la biblioteca CRISPRi

Referencias bibliográficas:



viernes, 7 de diciembre de 2018

Terapia regenerativa en neumonía por Streptococcus pneumoniae

Durante la neumonía neumocócica el citoplasma de las células epiteliales ciliadas pulmonares indican una mayor expresión de ARNm que codifica la proteína MIWI2 (regula las respuestas inmunes innatas del pulmón durante una infección pulmonar) de Piwi, la expresión de MIWI2 se localizó exclusivamente en vías aéreas conductoras. En este estudio las células madre pluripotenciales inducidas fueron generadas a partir de los ratones Knock-triples, Miwi/Mili/Miwi2 se diferenciaron en las tres capas germinales. Por otro lado, esta proteína MIWI2 marca una subpoblación de células multiciliadas en las vías aéreas de humanos y de ratón.

Células madre de la región alveolar del ratón y su papel de respuesta frente a la lesión


Referencias:



sábado, 1 de diciembre de 2018

Un ejemplo de transgénico vegetal o animal en neumonía por Streptococcus pneumoniae

Ejemplo de transgénico animal 
En este estudio se utilizó un modelo de ratón CCL2 transgénico infectado con Streptococcus pneumoniae (productor de neumolisina) cuya respuesta al ataque se encontró en las células epiteliales alveolares de tipo II (CCL2 tg) con el desarrollo de lesiones profundas de característica OP, neumonía organizada, que afectan a los bronquiolos periféricos y alvéolos aproximadamente siete días después de la infección. Por otro lado se investigó los factores relacionados con la inflamación expresados tanto en humanos como en el ratón trangénico: TGFB1/tgfb1, TIMP1/timp1, entre otros. 
De esta manera se comparó las lesiones histopatológicas, además se analizó la expresión génica vinculada con la fibrosis en compartimientos pulmonares individuales en ratones CCL2 humanos y transgénicos. 


Lesiones presentes en neumonía organizada teñidas con hematoxilina y eosina. En ratones transgénicos (a,b y c) y en pulmones OP humanos (d, e y f).
Ventajas:
1. Mediante la creación de animales trangénicos se permite el estudio de las diversas fases de una determinada enfermedad.
2. En la producción animal y el campo biosanitario.
3. Mejora de avances en lo que respecta al transplante de órganos.
4. En la agricultura con la creación de plantas transgénicas resistentes a insecto-plagas y patógenos.
5. Producción de biofármacos a partir de fluidos corporales animales. Por ejemplo el cerdo.

Desventajas:
1. Manipulación de genes en un organismo conlleva a potenciar, silenciar o alterar las proteínas.
2. En lo que respecta a los alimentos transgénicos existe una posible generación de alergias y toxicidad.
3. Objeciones éticas implicadas en los distintos países.
4. En los xenotransplantes se puede producir reacciones hiper-agudas de rechazo al injerto.
5. Podría existir riesgos a largo plazo al vincularse los transgénicos con el medio ambiente.

Referencias: